Centrifugační zkumavka je jednoduchá zkumavka, která vydrží vysokou rotační rychlost a tlak, jako je separace některých vzorků a separace sedimentů supernatantu.Zkumavka ultrafiltrační centrifugy má dvě části podobné vnitřní trubici a vnější trubici.Vnitřní trubice je membrána s určitou molekulovou hmotností.Během vysokorychlostní centrifugace budou ty s menší molekulovou hmotností prosakovat do spodní trubice (tj. vnější trubice) a ty s větší molekulovou hmotností budou zachyceny v horní trubici (tj. vnitřní trubici).Toto je princip ultrafiltrace a často se používá ke koncentraci vzorků.
Ultrafiltrační centrifugační zkumavky lze obvykle použít bez předúpravy, ale pro zpracování proteinových vzorků, zejména u zředěných proteinových roztoků (< 10 ug/ml), není rychlost výtěžnosti koncentrace s ultrafiltračními membránami často kvantitativní.Přestože materiály PES minimalizují nespecifickou adsorpci, některé proteiny, zvláště když jsou zředěné, mohou mít problémy.Stupeň nespecifické vazby se mění se strukturou jednotlivých proteinů.Proteiny obsahující nabité nebo hydrofobní domény se s větší pravděpodobností nevratně vážou na různé povrchy.Pasivační předúprava na povrchu zkumavky ultrafiltrační centrifugy může snížit ztrátu adsorpce proteinů na povrchu membrány.Ve většině případů může předúprava kolony před zakoncentrováním zředěného proteinového roztoku zlepšit rychlost regenerace, protože roztok může vyplnit prázdná místa pro adsorpci proteinu exponovaná na membráně a povrchu.Pasivační metoda spočívá v tom, že se kolona předem namočí větším objemem pasivačního roztoku na dobu delší než 1 hodinu, kolona se důkladně promyje destilovanou vodou a poté se jednou odstředí s destilovanou vodou, aby se úplně odstranil pasivační roztok, který může zůstat na filmu. .Dávejte pozor, aby film po pasivaci nezaschl.Pokud ji chcete použít později, je třeba přidat sterilní destilovanou vodu, aby byla fólie stále vlhká.
Ultrafiltrační centrifugační zkumavky nelze obvykle sterilizovat a znovu použít.Vzhledem k tomu, že cena jedné zkumavky není levná, mnoho lidí ji zkouší znovu použít – zkušenost je mnohokrát vyčistit povrch membrány destilovanou vodou a jednou nebo dvakrát odstředit.Malou zkumavku, kterou lze odstřeďovat obráceně, lze ponořit do destilované vody a následně odstřeďovat obráceně vícekrát, což bude lepší.Může být použit pro stejný vzorek opakovaně a může být namočený v destilované vodě, když se nepoužívá, ale je třeba zabránit bakteriální kontaminaci.Nemíchejte různé vzorky.Někteří lidé říkají, že namáčení ve 20% alkoholu a 1n NaOH (hydroxid sodný) může zabránit růstu bakterií a zabránit vysychání.Dokud ultrafiltrační membrána napadá vodu, nelze ji nechat vyschnout.Jiní však říkají, že to zničí strukturu membrány.V každém případě výrobci obecně nepodporují opakované použití.Opakované použití zablokuje velikost pórů filtrační membrány a dokonce způsobí únik kapaliny, což ovlivní výsledky experimentu.
Čas odeslání: září-05-2022