Specifické kroky buněčné kultury

1. Společné vybavení

1. Vybavení přípravny

Jednoduchý destilátor destilované vody, destilátor dvojité destilované vody, nádrž na kyselinu, trouba, tlakový hrnec, skladovací skříň (uchovávání nesterilizovaných předmětů), skladovací skříň (ukládání sterilizovaných předmětů), balicí stůl.Vybavení v přípravně roztoku: torzní váha a elektronické váhy (vážení léků), PH metr (měření hodnoty PH kultivačního roztoku), magnetické míchadlo (konfigurace místnosti s roztokem pro míchání roztoku).

2. Vybavení kulturní místnosti

Nádrž na kapalný dusík, úložná skříň (ukládání drobností), zářivka a ultrafialová lampa, systém čističky vzduchu, nízkoteplotní chladnička (- 80 ℃), klimatizace, tlaková láhev s oxidem uhličitým, odkládací stolek (psaní zkušebních záznamů).

3. Vybavení, které musí být umístěno ve sterilní místnosti

Centrifuga (sběr buněk), ultračistý pracovní stůl, inverzní mikroskop, CO2 inkubátor (inkubační kultura), vodní lázeň, tříkyslíkový dezinfekční a sterilizační stroj, 4 ℃ chladnička (umístění séra a kultivačního roztoku).

2、 Aseptický provoz

（1） Sterilizace sterilní místnosti

1. Pravidelně čistěte sterilní místnost: jednou týdně nejprve vytřete podlahu vodou z kohoutku, vytřete stůl a vyčistěte pracovní stůl a poté k vytírání použijte 3 ‰ lysol nebo bromogeramin nebo 0,5% kyselinu peroctovou.

2. Sterilizace CO2 inkubátoru (inkubátoru): nejprve otřete 3 ‰ bromogeraminem, poté otřete 75% alkoholem nebo 0,5% kyselinou peroctovou a poté ozařte ultrafialovou lampou.

3. Sterilizace před experimentem: zapněte ultrafialovou lampu, tříkyslíkový sterilizátor a systém čističky vzduchu na 20–30 minut.

4. Sterilizace po experimentu: ultračistý stůl, postranní stolek a stolek obráceného mikroskopu otřete 75% alkoholem (3 ‰ bromogeramin).

Sterilizační příprava laboratorního personálu

1. Umyjte si ruce mýdlem.

2. Noste izolační oděv, izolační čepice, masky a pantofle.

3. Otřete si ruce vatou 75% alkoholu.

Ukázka sterilního provozu

1. Všechny lahve s alkoholem, PBS, kultivačním médiem a trypsinem vnesené do ultračistého pracovního stolu je třeba otřít 75% alkoholem na vnějším povrchu lahve.

2. Pracujte v blízkosti plamene alkoholové lampy.

3. Nádobí musí být před použitím sterilizováno.

4. Nádobí (jako jsou uzávěry lahví a kapátka), které budete nadále používat, by mělo být umístěno vysoko a během používání by se mělo stále přehřívat.

5. Všechny operace by měly být v blízkosti alkoholové lampy a činnost by měla být lehká a přesná a neměla by se dotýkat náhodně.Pokud se brčko nemůže dotknout nádrže na odpadní kapalinu.

6. Při nasávání více než dvou druhů kapalin věnujte pozornost výměně sacího potrubí, aby se zabránilo křížové kontaminaci.

Viz další kapitola o dezinfekci nástrojů.